文章中——大家好，给大家介绍一下，这是生命起源“密室”@ART实验室

，我们已经初步了解辅助生殖中心最重要的组成部分——ART实验室的标准、特殊设备、用品，以及严防弄错配子的各项举措。

除此之外，每天胚胎室工作人员都要在不同的岗位完成培养试剂准备、采卵、受精、胚胎评估、移植、胚胎冷冻、胚胎复苏、胚胎活检、辅助孵化等各项工作。这些工作都是怎样进行的呢

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取卵前一天

实验室的工作人员已经开始准备工作，要将每个患者取卵和胚胎培养所需的培养皿标记上姓名、病历号等标识，放好培养液，覆盖好无菌矿物油防止液体的渗透压改变，将其提前放到培养箱里，以使第二天卵子取出来就能进入最适合它们的温度和PH环境，舒舒服服的开始ART实验室的旅程。

图1：每位患者的培养皿都标上了姓名、病历号等标识

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第0天（取卵日）

取卵通常一早开始，工作人员要提早进入胚胎室，打开百级净化台，检查培养箱和各种仪器的状态，准备捡卵用的各种器皿，确保一天工作顺利进行。

医生将从患者卵泡中抽取的含有卵子的卵泡传递进入胚胎室，胚胎学家在百级净化、37℃恒温台面的超净工作台内，将其倒入无菌的培养皿，在体式显微镜下寻找卵子，找到卵子后在新鲜的37℃培养基中多次冲洗去掉血细胞，最后将其放至培养箱中等待受精。

图2：手术室与胚胎实验室之间的传递窗

图3：胚胎学家正在捡卵

在妻子取卵的同时，丈夫通过手淫取得的精液也送到了实验室，通过培养液的洗涤筛选，去除精液中的杂质，提取出动力最好的精子供授精用。

对于精液质量好的患者，胚胎学家直接将一定浓度的精子加入放置卵子的培养液中，让其自然结合；对于精液质量差的患者，精子数目或活力不足以使卵子自然受精，胚胎学家会在显微镜下使用显微操作系统用显微注射针将一个精子穿刺注射入一个卵子，帮助其受精，注射好的卵子放回培养液放至培养箱过夜。

图4：单精子卵胞浆内显微注射

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第1天（D1）

早上，胚胎学家们会观察卵子的受精情况，正常受精的卵子会出现两个原核，出现多于两个原核的受精卵被捡出丢弃，正常的受精卵被转移到胚胎培养基中。

图5：出现两个原核的受精卵

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第2天（D2）

早上再次检查受精卵的发育情况，受精卵这时分裂为2-4细胞（卵裂球）的胚胎，胚胎发育速度这时已显示出差距，有些胚胎会出现碎片，如果碎片持续增多，胚胎质量将下降。

图6：2细胞

图7：4细胞

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第3天（D3）

早上再次检查胚胎的生长情况，此时的胚胎应该发育至6-8细胞，胚胎学家会根据胚胎的发育速度、碎片程度和卵裂球的均一程度给胚胎评分，挑选出D3天的可用胚胎，质量差的胚胎将被废弃。

图8：8细胞

如果患者的内膜和激素条件适合移植胚胎，那么胚胎学家会挑选质量好的胚胎，供医生移植入患者体内，剩余出来的胚胎或者冷冻保存，或者转移至囊胚培养液继续培养至囊胚。

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第5天和第6天（D5&D6）

对于D3没有移植或者冷冻而是继续培养的胚胎，D5早上胚胎学家要再次检查胚胎的生长情况，发育正常的胚胎此时应该是有了一个完整的囊腔（滋养层-未来的胎盘），囊腔里有一团细胞（内细胞团-未来的胎儿），囊腔里充满囊腔液体。

图9：囊胚

D5到D6这段时间里，囊胚的直径增大，囊腔越来越大，体积也越来越大，胚胎外面包裹的透明带逐渐变薄，最终透明带外壳会打开，胚胎从透明带内孵出。没有发育到囊胚的胚胎将被废弃。囊胚期的胚胎同样根据患者的具体情况来决定是移植入宫腔还是冷冻保存。

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胚胎活检

对于要进行胚胎植入前遗传学筛查（PGS）的胚胎，在D3天胚胎卵裂期或D5／D6天囊腔期的时候，胚胎学家需要在显微镜下使用显微操作系统控制特制的胚胎活检针，从胚胎上取下一个或几个细胞，放入细胞裂解液，送到遗传实验室去检测胚胎的遗传物质是否正常。

图10：胚胎活检

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胚胎的冷冻和复苏

D3、D5、D6的不移植入宫腔的可用胚胎和胚胎活检完毕的胚胎要通过特殊的程序冷冻保存起来，供以后条件适合的时候再次复苏出来进行移植。

图11：液氮

目前胚胎的冷冻技术非常成熟了，多采用玻璃化冷冻的方式，采用特殊的冷冻保护剂，将胚胎冻存于零下196℃，复苏的时候将胚胎从液氮中取出，放入复苏保护剂中，逐步去掉胚胎中的冷冻保护剂，唤醒胚胎。这种冷冻-复苏技术的复苏成功率可达99%以上，可以很好的保存胚胎的活性，并且由于冻胚移植周期的激素内膜环境更接近自然状态，成功率普遍比新鲜周期会高一些。

图12：胚胎存放在液氮罐中

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辅助孵化

D3要移植的胚胎，如果观察到透明带有异常，或者冷冻复苏后的胚胎考虑可能会有透明带硬化的情况下，胚胎学家会在显微镜下，使用激光辅助孵化系统将部分透明带削薄，目的是使胚胎更容易从透明带削薄的地方孵出。

图13：激光辅助孵化技术

孙贻娟副主任医师医者说

孙贻娟，女，博士，副主任医师，国家二级心理咨询师，集爱遗传与不育诊疗中心胚胎实验室副主任。主要从事不孕症诊治、辅助生育技术（ART）临床、实验室和多项研究工作；熟练掌握妇产科学、生殖内分泌、辅助生殖技术理论知识和胚胎培养室各项操作、临床促排卵等常规诊疗技术；在人类胚胎、配子冻存方面有较多经验。

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